Ароматические амины и амиды

нием для предположения, что метаболически активной формой МАБ в печени крыс является эфир N-гидрокси-МАБ.

Дальнейшим подтверждением того, что реактивной формой МАБ in vivo мог бы быть эфир N-гидрокси-МАБ, стало изучение характеристик связанных с белком красителей в печени крыс, получавших с диетой МАБ. Полярные красители, освобождающиеся при гидролизе белков печени, также могли образовываться в реакции N-бензоилокси-МАБ с подходящей аминокислотой:

О^ЧЭ-С^о :£=: >»/

н

+ метионии

+ цистами

+ тирозин

♦триптофан I

Полярный              Полярные красители

сульфониевый краситель

Несколько позже было показано, что связанные с нуклеиновыми кислотами производные, образованные из МАБ в печени крысы in vivo, также возникают из эфиров N-гидрокси-МАБ или производных со сходной реактивностью [Miller J. , 1970]. Таким образом, деградация РНК и ДНК из печени крыс, получавших инъекции меченного ³Н МАБ, дает производные, которые хромато-графически идентичны соединениям, приготовленным в реакции N-бензоилокси-МАБ с гуанозином или дезоксигуанозином. Последние продукты были охарактеризованы как ^(гуанозин-8-ил)-МАБ и ^(дезоксигуанозин-8-ил)-МАБ.

Эти исследования структуры конечных продуктов, образованных в реакции дериватов красителей с белками и нуклеиновыми кислотами in vivo, не установили идентичности реактивных метаболитов. Однако предположение, что эфиры N-гидрокси-МАБ являются метаболическими интермедиатами, подтверждается сходными реактивностями N-бензоилокси-МАБ и реактивностью метаболитов in vivo, а также данными, устанавливающими корреляцию образования сернокислого эфира N-гидрокси-ААФ с гепато-канцерогенностью этой гидроксамовой кислоты (см. ниже).

Метаболическая активация N-гидрокси-ацетиламинофлюорена in vivo. Расшифровка реактивной формы ААФ была ярким этапом блестящей серии работ J. Miller и Е. Miller в области изучения химического канцерогенеза. Подобно N-бензоилокси-МАБ, N-ацетокси-ААФ и N-бензоилокси-ААФ оказались сильными электрофильными агентами. Они реагировали с метионином и метионин-пептидами, и образующиеся сульфониевые производные расщеплялись с образованием смеси 1- и 3-метилмеркапто-ААФ. Печеночные белки крыс, получавших ААФ или N-гидрокси-ААФ, давали при обработке щелочью одни и те же О-метилмеркапто-ацетиламинофлюорены. Связанные с белками производные в печени крыс, дававшие начало 1- и 3-метилмеркапто-ААФ, объяс-