Репликация ретровирусов

они включают также в свой состав несовершенный инвертированный (обратный) повтор длиной 5—22 нуклеотида, который терминирует структуру LTR с двух сторон (Shimotohno К- et al. , 1980; Kung H. et a!. . 1981; Varmus H. , Swanstrom R. , 1982].

Механизм образования линейной двухцепочечной формы вирусной ДНК in vitro в общих чертах изучен. Ряд стадий этого процесса подтвержден в случае репродукции ретровирусов в клетке.

Линейная форма ДНК с одинаковой эффективностью синтезируется в цитоплазме как ядерных, так и безъядерных клеток, что свидетельствует о ее цитоплазматическом происхождении [Varmus H. , 1982; Varmus H. et al. , 1982]. В дальнейшем линейная ДНК транспортируется в ядро, где происходит превращение линейной формы провируса в кольцевую.

Формирование кольцевого провируса является последним этапом перед интеграцией вирусного и клеточного геномов. Процесс образования кольцевой молекулы хорошо документирован, и основная роль в нем отводится LTR. Клонирование, а затем последующее секвенирование вирусной ДНК показали, что она может содержать один или два LTR (см. рис. 3). В последнем случае два LTR располагаются в прямом тандемном повторе [Varmus H. et al. , 1979; Kung H. et al. , 1981; Varmus H. , Swanstrom R.
, 1982]. Как правило, циркулярный ДНК-провирус представляет собой мономер, хотя иногда из инфицированных ретровирусами клеток удается изолировать и олигомерные структуры [Varmus H. , Swanstrom R. , 1982].

Циркулярная ДНК может быть выделена только из ядерной фракции инфицированных клеток [Varmus H. , Swanstrom R. , 1982]. Вероятно, именно в ядре обеспечивается процесс циркуля-ризации молекулы провируса.

Открытие циркулярной формы ДНК-провируса ретровирусов позволило выдвинуть предположение о едином механизме интеграции в геном хозяина генетического материала не только ретро-вирусов, но и ДНК-содержащих онкогенных вирусов, таких как паповавирусы, или, например, фага X. Для последнего были получены строгие доказательства необходимости процесса образования кольцевой формы молекулы ДНК в период интеграции провируса в геном хозяина. Однако на сегодня прямых доказательств существования подобного способа интеграции ретрови-русной ДНК не существует.

В настоящее время широко распространено мнение, что структура ДНК-провируса в общих чертах напоминает структуру транспозонов, т. е. мобильных генетических элементов, обнаруженных у бактерий и у дрозофилы [Георгиев Г. П. , 1983; Calos M. , Muller J. , 1980; Dunsmuir P. et al. , 1980; Shimotohno K. et al. , 1980]. Большинство этих генетических единиц, состоящих из нескольких тысяч неповторяющихся последовательностей, терминируются прямыми и (или) обратными повторами длиной до