Клеточные трансформирующие гены

вызывать трансформацию клеток NIH ЗТЗ. В трансформантах удалось идентифицировать онкоген типа Ha-ras. На основании этих опытов авторы приходят к заключению о том, что активация онкогена ras не связана причинно с малигнизацией, а является лишь проявлением гетерогенности меланом человека.

Свойства и функции продукта активированного, а также нормального протоонкогена c-Ha-ras, изучены пока недостаточно полно. Однако известно, что белок р21 локализуется на внутренней поверхности цитоплазматических мембран, т. е. его клеточной мишенью, вероятно, являются белки цитоскелета и белки клеточных мембран, а именно рецепторы. По-видимому, р21, обладающий свойствами протеинкиназы, фосфорилирует рецептор для фактора роста — трансферрина, обеспечивая тем самым независимость клетки от внешних регуляторных сигналов и ростовых факторов [Cooper J. et al. . 1984).

Помимо фосфорилирования клеточных мишеней, белок р21, в котором произошла замена в 12-м положении аминокислоты глицина на валин, подвергается аутофосфорилированию. Ауто-фосфорилирование происходит по аминокислоте треонину, располагающейся в 59-м положении. Нормальный р21 в этом положении содержит аминокислоту аланин и, соответственно, не способен к аутофосфорилированию. Значительное увеличение аутофосфори-лирования онкобелка р21, по-видимому, определяет его биохимическую активность и трансформирующие свойства [Gibbs J. et al. , 1984; McGrath et al.
, 1984].

R. Wierenga и W. Hoi (1983) сравнили последовательности 37 остатков аминокислот N-терминального конца белка р21 из нормальных клеток человека с последовательностью Рсф-участка структурно-родственных энзимов (например, р-гидроксибензоат гидроксилазы), связывающих, подобно р21 белкам, динуклеотиды. Этот анализ показал, что аминокислотные остатки позиций 5—33 белка р21 формируют гомологичный указанным белкам-ферментам Эсф-участок, который выполняет существенную роль в связывании нуклеотидов или динуклеотидов. Авторы разработали трехмерную модель участка pop белка р21, которая объясняет, почему глицин в 12-м положении не может быть заменен другим остатком без нарушения способности трансформирующего белка связывать нуклеотиды.

Участками связывания дезоксигуанозинтрифосфатов или де-зоксигуанозиндифосфатов (дГТФ или дГДФ) являются позиции 12—13 и 59—63 белка р21 [Fasano О. et al. , 1984J. Следует отметить, что к белкам, обладающим высоким сродством к дГТФ и дГДФ, относятся также фактор элонгации, тубулин, трансдуцин и рецептор эукариотической аденилатциклазы. Однако наибольшее родство обнаружено между онкобелком р21 и фактором элонгации (50% гомологии) [Leberman R. , Euger U. , 1984J.

М. Gay и J. Walker (1983) подчеркивают, что аминокислотные последовательности, окружающие 12-ю позицию аминокислоты