Клеточные трансформирующие гены

 

12 3 4                5

6         7 8 9 10 11 12

«i                                                                          -*- 21. 7

Рис. 12. Гибридизация Sac 1-фрагментов ДНК первичных и вторичных трансформантов клеток NIH ЗТЗ с c-Ha-ras 1 онкогеном (плазмида) pEJ 6,6.

1 — Sac 1 локус онкогена c-Ha-ras в EJ-клетках рака мочевого пузыря человека. Фрагмент размером 2,9 т. п. о. содержит последовательности, комплементарные v-Ha-ras-онкогеиу; 2 — ДНК первичных трансформантов EJ-F5, индуцируемых EJ ДНК; 3 — ДНК клеток NIH ЗТЗ, в данной постановке эксперимента проба pEJ 6,6 не выявляет вирус-специфические последовательности, комплементарные эндогенному мышиному с-На-ras-протоонкогену; 4 — Sac I локус протооикогена c-Ha-ras 1 в ДНК JA-I клеток злокачественной меланомы человека: 5 — ДНК первичных трансформантов JASA-3. индуцируемых ДНК JA-I; 6- ДНК вторичных трансформантов MJ-I, возникающих от ДНК JA-I (все три фрагмента: 21 т. п. о. , 3, 4 т. п. о. и 2,9 т. п. о. комплементарны v-Ha-ras, что определено пробой pBS-9; 7 — Sac 1-локус протооикогена c-Ha-ras I в ДНК LA-N-I (клетки иейробластомы человека): 8 — ДНК первичных трансформаитов LASA-I, индуцируемых ДНК LAN-I; 9—Sac I-локус протооикогена c-Ha-ras I в ДНК SK-BR-3 (клетки рака молочной железы человека); 10 — ДНК первичных трансформантов, клон клеток SRSA-1, индуцируемых ДНК SK-BR-3; II — Sac I-локус протооикогена c-Ha-ras 1 в ДНК HVM (клетки нормальной слизистой оболочки желудка человека); 12 — Sac 1-локус протооикогена c-Ha-ras 1 в ДНК Са VSt (клетка рака желудка человека). Стрелками обозначены Sac I-фрагменты донорских препаратов ДНК, содержащих вирусспецифи-ческне последовательности, комплементарные онкогену v-Ha-ras 2,9 т п. о.
, и фланкирующие последовательности, комплементарные трансформирующему гену EJ-c-Ha-ras I 5,15 т. п. о. и 6,0 т. п. о. Локус протооикогена c-Ha-ras 2 в данной постановке эксперимента

не выявляется.

комплементарных v-Ha-ras (проба BS-9). Такие изменения, обнаруженные во втором цикле трансфекции клеток NIH ЗТЗ, возможно, отражают интеграцию в геном реципиентных клеток дополнительных копий онкогена. Дальнейший рестрикционный анализ показал, что указанные трансформирующие гены человека (c-Ha-ras 1) не содержали точковой мутации в 12-м кодоне.

Спонтанная активация клонированного протооикогена с-На-ras 1 была обнаружена в ходе экспериментов по трансфекции клеток NIH ЗТЗ препаратом ДНК плазмиды pBR-322 с вставкой нормальной аллели c-Ha-ras 1 — оригинальное название протооикогена c-has/bas (human. ). В этом случае спонтанная активация была обусловлена заменой Г->-А все в том же 12-м кодоне с-На-ras 1 протооикогена для белка р21 [Santos E. et al. , 19831-

В 13% случаев всех тестированных клеточных линий меланом человека онкогены семейства ras находились в активированном состоянии [Albino A. et al. , 1984]. Авторы полагают, что активация Ha-ras происходит на поздних стадиях прогрессии опухолевых клеток и она не связана инициацией клеточной трансформации. Как показал анализ трансформирующей активности препаратов ДНК (5 образцов) из различных метастазов меланомы -одного и того же больного, лишь один препарат ДНК был способен

.

Часть 1 Часть 2 Часть 3 Часть 4 Часть 5 Часть 6 Часть 7 Часть 8 Часть 9 Часть 10 Часть 11 Часть 12

Комментарий:
Автор Афанасий:
Отечество раба там, где палка.
Автор Гульназ:
Кто ничего не знает, тот вынужден всему верить.
Автор Zuhra:
Единожды солгавши, кто тебе поверит?

Ваше имя:

Комментарий: