Влияние метилирования ДНК на экспрессию онкогенов

номы мышей, где отмечены существенные перестройки этого гена, и в двух опухолевых крысиных клеточных линиях нейроэкто-дермального происхождения, сериях TV и GV [Huh N. et al. , 1983J. Группа Dino-Dina [Cattoni S. et al. , 1982) изучила метилирован-ность «молчащего» гена c-mos в клеточных линиях мышей и крыс, трансформированных вирусом саркомы мышей (несущим онкоген v-mos) или химическими веществами. Оказалось, что в обоих случаях протоонкоген c-mos был гиперметилирован, тогда как v-mos — интегрированный в мышиный геном и экспрессируемый — был гипометилирован. Для определения степени метилированности протоонкогена c-mos авторы использовали двойную рестрикцию образна ДНК разными эндонуклеазами: Sac 1, «вырезающей» весь c-mos, и Нра II или Msp I, «узнающими» метилирование цитозина в б'-ЦГ-последовательности [Gattoni S. et al. , 1982).

A. Feinberg и В. Vogeltein (1983), используя генно-инженерную технику, определили уровень метилирования двух клеточных протоонкогенов — Ha-ras и Ki-ras — в нескольких аденокарцино-мах кишечника человека и сопоставили их метилированность с таковой Ha-ras и Ki-ras в препаратах ДНК прилежащего к опухоли нормального эпителия. Авторы обнаружили относительное гипометилирование протоонкогена в 6 из 8 аденокарцином. Эти же исследователи показали, что некоторые нормальные гены человека, например гормона роста и а-глобина, существенно гипометили-рованы в ряде карцином кишечника и легких по сравнению с прилежащими к опухоли здоровыми тканями. Гипометилирование этих генов было еще более значительным в метастазах опухоли в селезенку {Feinberg A.
, Vogelstein В. , 1983). Эти результаты дают достаточно удовлетворительное объяснение также феномену ненормального синтеза некоторых гормонов и эмбриональных белков опухолевыми клетками, причиной которого может быть гипометилированное состояние соответствующих генов. На основании этих данных можно предполагать, что ненормальная экспрессия некоторых генов при раке, возможно, является результатом нарушения процесса метилирования ДНК [Feinberg A. , Vogel-stein В. , 1983).

Нам также удалось показать |Huh N. et al. , 1983) связь экспрессии генов со степенью их метилирования. Так, было установлено, что экспрессия Ha-ras в опухолях мозга крыс, индуцированных этилнитрозомочевиной (клеточные линии серий ВТ, GV и TV) [Laerum D. , Rajewsky M. , 1975), коррелировала с его относительным гипометилированием. В эмбриональных клетках мозга крыс (клетки-мишени), где также имеет место экспрессия Ha-ras, было отмечено снижение уровня метилирования указанного протоонкогена, о чем судили по результатам действия рестриктаз Нра II/Msp I, распознающих метилированные и не-метилированные основания.

Таким образом, представленные результаты свидетельствуют в пользу мутационной природы относительного гипометилирования