Влияние метилирования ДНК на экспрессию онкогенов

Важные результаты, подтверждающие связь метилирования ДНК с экспрессией генетической информации и дифференци-ровкой, были получены при использовании аналога цитозина, 5'-азацитидина (т. е. цитозин, в котором углерод в 5-м положении заменен на атом азота, вследствие чего он не может быть метилирован).

NH,                                       NH,                                       NH₂

Рибоэа                              Рибоза                              Рибоэа

цитозин                     5 -метилцитозин              б'-азацитидин

P. Jones и S. Taylor (1980) показали, что б'-азацитидин тормозит метилирование вновь синтезированной ДНК в условиях культуры клеток. Авторы обнаружили, что присутствие этого аналога цитозина в клеточной культуре индуцирует в эмбриональных клетках мышей формирование мышечных клеток. Следовательно, в данном случае снижение уровня метилирования ДНК прямым образом влияло на миогенную дифференцировку. В последующем изучение связи экспрессии различных генов, например генов металлотионина и овальбумина с их метилированием подтвердило это положение.

R. Jaenisch и соавт. 0982) получили результаты, свидетельствующие о существенном влиянии метилирования ДНК на экспрессию эндогенных провирусных генов, интегрированных в различные участки мышиного генома. Провирусные геномы, которые не экспрессировались и поэтому были неинфекционны в экспериментах по трансфекции, оказались высокометилированными [Jaenisch R. , 1982].
Напротив, удаление метильных групп путем особого клонирования генов в векторах бактериальных систем способствовало превращению провирусов в экспрессируемые, высокоинфекционные [Simon D. et al. , 1983].

На сегодня только незначительное число исследований посвящено изучению связи экспрессии протоонкогенов с метилированием их экзонов и интронов, а также прилежащих и усиливающих последовательностей. Два протоонкогена, c-mos и c-ras, были изучены в этом отношении более детально, поэтому мы рассмотрим эти работы подробнее.

Скрининг экспрессии различных протоонкогенов в многочисленных клеточных линиях нормального и опухолевого происхождения показал, что в них не экспрессируется лишь протоонкоген c-mos. Поэтому ген c-mos можно в принципе отнести к «молчащим» генам [Blair D. et al. , 1981; Watson R. et al. , 1982; Muller R. , 1983; Murray M. et al. , 1983). Тем не менее, экспрессия протоонкогена c-mos была все же обнаружена в клетках злокачественной мела-

19»