Активация клеточных протоонкогенов в онкогены

сформирующем белке. Единственная замена аминокислоты в этой позиции, таким образом, представляет собой общий механизм активации трансформирующей активности в клеточных онкогенах ras, выявляемой трансфекцией клеток NIH ЗТЗ. Сходно с этим высокогомологичные трансформирующие белки р21, кодируемые мышиными саркомными вирусами Харвея, BALB и Кирстена, имеют соответственно аргинин, лизин и серии в положении 12. Мутация, ответственная за активацию клеточных генов, возникла благодаря трансверсии Г-*-Т. тогда как в трансформирующих ретровирусах гены были активированы, по-видимому, благодаря переходу Г-*-А, возможно, в результате ошибок при обратной транскрипции.

Таким образом, исследование клеточных линий карцином легкого и толстой кишки человека показало, что различные точковые мутации в одном и том же кодоне могут активировать клеточный ген c-Ki-ras 2 и поэтому большинство последовательностей информационных РНК, транскрибированных с этого гена, используют участки 4-го кодирующего экзона, отличающиеся от вирусного партнера.

D. Capon и соавт. (1983) осуществили анализ последовательностей ДНК активированного онкогена из линии клеток Т24 карциномы мочевого пузыря человека и двух аллелей его нормального клеточного прародителя (c-Ha-ras 1). Анализ показал, что гены содержат, по крайней мере, 4 экзона и только единственная точковая мутация, находящаяся в 1-м экзоне, различает кодирующую область обеих аллелей нормального гена от их активированного партнера. Оба варианта гена кодируют белок, который отличается от соответствующего продукта вирусного гена по трем аминокислотным остаткам, один из которых, как было показано ранее, представляет главный сайт фосфорилирования вирусного полипептида.

С момента установления в 1982 г. положения о том, что между трансформирующим геном клеточной линии человеческого рака мочевого пузыря и его нетрансформирующим вариантом в нормальных клетках различие заключается лишь в одном нуклеотиде, началась «охота» за другими примерами подобных изменений.
Не все попытки были успешными. Так, A. Feinberg и соавт. (1983) не обнаружили точковой мутации в 12-й аминокислоте в продукте онкогена Ha-ras в 29 различных раковых опухолях человека. Однако представление об участии точковых мутаций в активировании клеточных протоонкогенов не было этим поколеблено. Более того, обнаружили другую мутацию в том же гене клеточной линии рака легкого человека [Yuasa Y. et al. , 1983].

Была изучена активация c-Ha-ras (или c-bas/has), клеточного гена, из которого, по-видимому, произошел онкоген вируса мышиной саркомы Харвея (Ha-MSV). Его продуктом является белок р21 (21 кд). В клеточных линиях Т24 и EJ карциномы мочевого пузыря человека точковая мутация изменила 12-ю аминокислоту