Онкогены ретровирусов млекопитающих

последовательности отмечены Ha-ras-специфической штриховкой. Следует отметить, что только клоны one-копий генома Ha-MSV, содержащие указанные последовательности, обладали трансформирующим потенциалом в экспериментах по трансфекции [Chang E. et al. , 1980; Bishop J. , Varmus H. , 1982].

Таким образом, геном вируса саркомы мышей штамма Харвей, по-видимому, содержит следующие области: 1) короткая последовательность около 2 т. о. на б'-конце, происходящая из генома вируса-помощника; 2) участок размером около 0,5 т. о. , гомологичный 30S РНК, происходящий из нормальных клеток крыс;

3)  участок размером 0,9 т. о. , представляющий собственно Ha-ras;

4)  локус 2,9 т. о. , гомологичный 30S РНК; и 5) участок 1,0 т. о. , родственный вирусу-помощнику (см. рис. 6).

Исходя из своеобразной «мозаичности» структуры генома Ha-MSV, ряд авторов высказали предположение, что геном этого ретровируса произошел путем как минимум двух рекомбинацион-ных событий. В результате первого рекомбинационного процесса был сформирован гибридный вирус: между вирусами лейкоза мышей MuMLV или Ki-MLV и эндогенным дефектным по репликации вирусом крыс (вирусоподобные частицы VL30). Гибридный вирус, несущий гены двух лейкозных вирусов грызунов, трансду-цировал затем соответствующий c-Ha-ras- или c-Ki-ras-онкоген (Ellis R.
et al. , 1980, 1981]. При этом c-ras оказался фланкирован последовательностями 30S РНК нормальных клеток крыс. Очередность рекомбинационных событий могла быть иной, и установить ее пока не представляется возможным.

Анализ и обсуждение фактов, касающихся онкогена ras, затрудняется тем обстоятельством, что эти трансформирующие последовательности в двух независимых изолятах На- и Ki-MSV происходят не от одного уникального клеточного гена, а от небольшого семейства генов. Члены этого семейства существенно дивер-гировали в процессе эволюции, сохранив при этом много общих признаков. Свойства продуктов онкогенов ras подтверждают это [Ellis R. et al. , 1981 ]. В клетках, трансформированных На- или Ki-MSV, антисыворотка преципитировала белок с молекулярной массой 21 кд, идентифицированный как продукт экспрессии онкогена ras. Белок p21^ras оказался фосфорилированным по тре-ониновым остаткам.

По аналогии с pp60^vsrc, one-продукт гена ras синтезируется как индивидуальный белок, а не полипротеин, и местом его синтеза являются свободные полирибосомы [Ellis R. et al. , 1981]. Следует вновь подчеркнуть, что p21^Tas синтезируется не на субгеномной, а скорее на геномной иРНК [Bishop J. , Varmus H. , 1982].

Методами иммунофлюоресцентной микроскопии в клетках, трансформированных Ha-MSV, p21^ras выявляется в тесной связи с клеточными мембранами [Willingham M. , 1980]. Белок не обнаружен на поверхности инфицированных клеток и не концентрируется в области контакта клеток друг с другом, а также в местах