Общие свойства ретровирусов

РЕПЛИКАЦИЯ РЕТРОВИРУСОВ

Прошло уже около полутора десятков лет, как утвердилось мнение о необходимости в репродуктивном цикле ретровирусов стадии промежуточного синтеза ДНК. Различные аспекты репликационной схемы: РНК-* ДНК-*-РНК-»-белок были изучены за этот период весьма детально. В первую очередь это относится к механизмам синтеза ДНК-провируса, т. е. к транскрипции вирусной РНК в ДНК с помощью фермента обратной транскрип-тазы. В настоящее время исследователи могут проследить буквально по часам ход реализации генетических программ при репродукции ретровирусов. Однако многие молекулярно-биологические события этого процесса все еще остаются недостаточно ясными.

Н. Temin (1964) первым высказал предположение о том, что для репродукции и трансформации клеток, инфицированных ретровирусами, необходим синтез ДНК, и обосновал это предположение экспериментально. В последующем указанное положение было многократно подтверждено [Bader J. , 1965; Baluda M. , 19721. Решающую роль при этом сыграло открытие в очищенных вирионах ВСР и других ретровирусов ферментной системы обратной транскрипции, непосредственно осуществляющей синтез ДНК-копии генома. Оно явилось прямым доказательством провирусной гипотезы [Temin H. , Baltimore D. , 1972]. Методами молекулярной гибридизации и трансфекции были получены свидетельства присутствия в геноме клетки-хозяина интегрированного ДНК-провируса, а также установлена его информационная емкость. Оказалось, что интегрированный ДНК-провирус содержит весь набор генов, необходимый как для репродукции вирусных частиц, так и для трансформации реципиентных клеток [Князев П. Г. и др.
, 1976; Baluda М. , 1972; Hill M. , Hillova J. , 1972; Hanafusa H. et al. , 1974]. Эксперименты по трансфекции подтвердили также возможность синтеза полноценного ДНК-провируса в бесклеточной системе [Boone L. , Skalka A. , 1981; Varmus H. , 1982].

Синтез провирусной ДНК. Прежде чем перейти к обсуждению вопросов образования провирусной ДНК, кратко рассмотрим структуру и функцию вирусной ДНК-полимеразы, роль и свойства затравки в этой реакции, а также формы вирусной ДНК, которые обнаруживаются в инфицированных клетках.

Основными энзиматическими активностями продукта гена pol являются: ДНК-полимераза, способная копировать РНК или ДНК-матрицы, и так называемая рибонуклеаза Н (РНКаза Н), гидролизующая РНК в гибридной молекуле РНК:ДНК [Gerard G. , Grandgenett D. , 1980; Varmus H. , 1982].

В структурном отношении и по антигенным свойствам ДНК-полимеразы различных штаммов ретровирусов отличаются друг от друга.

ДНК-полимераза вирусов саркомо-лейкозного комплекса птиц состоит из двух субъединиц: а — 58 кд и Р — 92 кд [Gerard G. ,